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7-AAD染色液

货号:P-CA-162

价格:¥200¥350¥550¥1100

规格:
50T
  • 50T
  • 100T
  • 200T
  • 500T
数量: - +
  • 7-AAD染色液
产品概述

      7-AAD染色液为Annexin V鉴定凋亡和坏死细胞辅助试剂。
      7-AAD可与双链DNA特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,7-AAD可进入细胞内对DNA进行染色,与Annexin V搭配使用,可区分处于不同凋亡时期的细胞。
      本试剂搭配Annexin V-APC检测喜树碱诱导的Jurkat细胞凋亡效果如下图所示:

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实验操作指南步骤:
      1. 细胞按照实验方案进行凋亡诱导,300g离心5min,弃上清,收集细胞,PBS洗涤一次,轻轻重悬细胞并计数。
注:本品仅在悬浮培养的细胞中验证,良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时,可能会因为胰酶消化、吹打等处理导致细胞的坏死或凋亡,对实验结果可能存在不可控的影响,请谨慎处理。
      2. 取1-5×10^5重悬的细胞,300g离心5min,弃上清。用PBS洗涤细胞一次,离心后弃上清,加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。
      3. 细胞悬液中加入5μL的Annexin V-荧光染色液和5μL的7-AAD染色液。
      4. 轻柔涡旋混匀后,室温避光孵育15-20min。

      5. 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测,请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。


保存条件:
     -20可保存1年;7-AAD染色液需要避光保存,建议将7-AAD染色液适当分装后-20℃保存。


注意事项:
     1. 为获得最佳的使用效果,请在3-6个月内使用;

     2. 染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加;
     3. 荧光物质均易发生淬灭,进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,操作和存放过程中注意避光保存;
     4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
 
(本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗)