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Annexin V-APC/ PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒

货号:P-CA-207

价格:¥820¥1380¥2200¥3280

规格:
20T
  • 20T
  • 50T
  • 100T
  • 200T
数量: - +
  • Annexin V-APC/ PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒
产品概述

      Annexin V-APC/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒用于鉴定凋亡和坏死细胞。
      Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记荧光染料APC利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。
      碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)可与双链DNA特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,PI可进入细胞内对DNA进行染色,与Annexin V搭配使用,可区分处于不同凋亡时期的细胞。
      本试剂盒检测喜树碱诱导的Jurkat细胞凋亡效果如下图所示:

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产品使用说明:
     本试剂盒中Annexin V Binding Buffer(10×)为10×浓缩液,实验前用去离子水稀释成1×工作液。
     例如:取1mL Annexin V Binding Buffer(10×),加入去离子水定容至10mL即可。


实验操作指南步骤:
      1. 细胞按照实验方案进行凋亡诱导,300g离心5min,弃上清,收集细胞,PBS洗涤一次,轻轻重悬细胞并计数。
      注:本品仅在悬浮培养的细胞中验证,良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时,可能会因为胰酶消化、吹打等处理导致细胞的坏死或凋亡,对实验结果可能存在不可控的影响,请谨慎处理。

      2. 取1-5×10^5重悬的细胞,300g离心5min,弃上清。用PBS洗涤细胞一次,离心后弃上清,加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。
      3. 细胞悬液中加入5μL的Annexin V-APC和5μL的碘化丙啶(PI)染色液。
      4. 轻柔涡旋混匀后,室温避光孵育15-20min。
      5. 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测,请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。


保存条件:
      4℃可保存1年;Annexin V-APC和碘化丙啶(PI)染色液需要避光保存。


注意事项:
      1. 为获得最佳的使用效果,请在3-6个月内使用,Annexin V-APC禁止冷冻保存;

      2. 染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加;
      3. 荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存;
      4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
 
(本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗)