细胞长得慢、传代不易贴壁，该怎么挽救？

　　各类细胞产品是我们做实验研究的基础，一支小小的细胞，关乎我们各种实验的成功与否，细胞的”小事情“，在实验中都是”大事情“，如果你的细胞出现生长缓慢、不贴壁等情况，那你可要注意了，这就是细胞状态不好的信号，要及时“挽救”，不然很有可能细胞就濒临死亡。

　　问题一：细胞生长缓慢

　　细胞长得慢是细胞培养过程中比较常见的问题，一般来说，细胞活力和浓度一直是细胞健康的标志，细胞长得慢的话，活力和浓度可能都会直线下降。

　　造成细胞生长缓慢的主要原因及解决方法：

　　1，新配置的培养基以及换了新的血清，细胞不适应;

　　解决方法：最好使用最适宜的培养基，如果条件不允许，可以换液时不要全量换液逐渐增加新的培养基比例，1/4、1/2、3/4到1，多传代几次，让细胞慢慢适应。

　　2，细胞密度不够

　　有些细胞是细胞依赖性细胞，密度过低生长缓慢;也可能是细胞分泌促生长活性物质过少，细胞连接不好等原因。

　　解决办法：增加细胞接种密度;将细胞从大皿转移至小皿培养;适当增加培养基血清浓度。

　　3，培养环境改变

　　细胞培养箱的温度、CO2、细胞的生存环境要适宜，一般来说最佳温度:是37 ℃， CO2:浓度为5% ， pH:为7.2-7.4，还有渗透压等，大家要注意调好，不要随意改变。

　　4，污染，如支原体，细菌，真菌等

　　解决办法：细胞污染是多方面的原因，一方面要严格无菌操作技术、保持清洁的环境，另一方面，污染之后要及时鉴别和处理，并且，建议大家使用品质良好的细胞株和培养基，这是是减少污染的最好方法。

　　5，细胞本身状态改变，如衰老等

　　解决办法：没有可逆的办法，只能及时更换新的细胞。

　　当然如果培养细胞是原代的话，生长速度是比较缓慢的，如果没有及时换液，营养成分不够，细胞也会生长缓慢。用螺旋口瓶培养细胞时，需将瓶盖微松，以保证通气，要保持培养箱内空气干净等。

　　其实只要条件适于细胞生长，细胞在自己的“小房子”里面舒适自由，那么，它一定会长得很快，并且，形态越来越“漂亮”。

　　问题二：细胞不贴壁

　　一般来说，正常情况下，细胞培养一段时间后，正常生长的小细胞们贴在壁上，优哉游哉地享受生活，而没能存活的细胞和其他种类的细胞则可能悬浮在上，如果你的细胞不贴壁，极有可能是没有存活下来。

　　细胞不贴壁可能原因及解决办法：

　　1，胰酶消化过度；解决方法：适当缩短胰酶消化时间或降低胰酶浓度。

　　2，支原体污染；解决方法：分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。

　　3，培养瓶瓶底不干净；解决方法：换用新的培养皿或者培养瓶。

　　4，消化液或培养液配制错误、过期储存、储存不当；解决方法：重新配置消化液或培养液

　　5，细胞老化；解决方法：同样，没有可逆的办法，只能及时更换新的细胞。

　　6，接种细胞起始浓度太低或太高；解决方法：根据细胞特性接种适量的细胞。

　　总之，养细胞需要耐心，要温柔，要不然她真的会给你颜色看哦。上文也提到了，使用品质良好的细胞株和培养基是减少污染的最好方法，同时也是保证细胞生长良好的前提。

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