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细胞支原体污染该怎么办?还能挽救吗?

来源:Procell  浏览量:  发布时间:2019-08-20 15:20:01

  要说做细胞实验大家最担心的是什么,那应该就是——细胞污染了,而其中支原体污染是细胞培养实验室重最常见、最“臭名昭著”的污染之一。

  为什么这么说呢?

  这是因为支原体污染几乎可影响所有细胞生长参数、代谢及研究的任一数据,并且,支原体缺乏细胞壁,所以常规的抗生素并不能对它们起到抵抗作用,而且由于其直径太小,滤菌器也无法过滤,所以,细胞一旦有支原体污染则十分难以被清除,会给我们的实验造成极大的损失。

  研究表明,细胞培养中有15-35%的细胞存在支原体污染,有些地区甚至高达80%。因此支原体检测成为了细胞质控中不可缺少的环节,被列入《中国药典》检测的范畴。

  细胞支原体污染的表现:

  细胞状态变差、生长变慢,在显微镜下观察可能会有小黑点,但培养基一般不发生浑浊。细胞传代以后就出现细胞间黑点,细胞空泡化,很多类似凋亡、坏死的细胞,最终细胞漂浮,完全死亡。

  支原体污染从何而来?

  1. 已受污染的细胞;

  2. 操作人员的疏失;

  3. 已受污染的培养基、血清 ;

  4. 操作环境不良、实验器具不洁等。

  检测有无支原体污染可做如下检查:

  ①相差显微境检测:将细胞按种于事先放置于培养瓶内的盖玻片上,24h后取出,用相差油镜观察,支原体呈暗色微小颗粒位于细胞表面和细胞之间。

  ②荧光染色法:荧光染色用能与DNA特异性结合的荧光染料Hoechst 33258,可使支原体内含有的DNA着色,染色后用荧光显微镜观察,镜下支原体为散在于细胞同围或附于细胞膜表面的亮绿色小点。

  ③电镜检查:用扫描电镜方法简便快速,也可以利用透射电镜。

  ④DNA分子条文检查或支原体培养等方法:检出率高,但方法较为复杂。

  如果检测到有支原体污染,该如何处理呢?

  方法1:直接弃之!

  这就非常简单粗暴了,如果还没做处理,还是赶紧弃之吧,抢救不如重新复苏了,另外对培养箱要做由里至外的清洁处理。

  方法2:使用支原体清除培养基

  如果你培养的细胞比较珍贵,直接丢弃可惜,那么在确定对细胞的基因及蛋白表达没有影响的情况下,可以使用——支原体清除培养基。

  推荐——普诺赛(Procell)支原体清除培养基

  此款支原体清除培养基是Procell在市面上已有的支原体清除培养基基础上开发的新一代产品,含有清除支原体的特殊成分(一种混合制剂,可通过抑制DNA和支原体生长所必须的相关蛋白合成来取得良好的支原体清除效果,最大程度上挽救珍贵的细胞,减少因支原体污染带来的损失)。

  此产品经过了数十种细胞的测试和长期的实验验证,对细胞无害,对清除支原体污染效果显著,能够很好的抑制和杀灭支原体。

  Procell支原体清除培养基的优势:

  1,活性范围广:各支原体株系均可作用。

  2,安全可靠:工作浓度低,无细胞毒性。

  3,使用方便:将支原体去除试剂加入污染培养物即可,操作简单。

  4,时效快:使用的第二天可以明显看出细胞内的小黑点变少,细胞状态变好。

  使用Procell支原体清除培养基处理污染细胞前后对比图:

TIM截图20190820152502.png

  温馨提醒:

  支原体污染不易察觉,但染上却可以毁了全部细胞,因此,希望大家在实验中多注意细节,如果发现细胞有不良表现,可以及时排查一下有无支原体污染、及时处理。

  另外,普诺赛拥有多种支原体清除培养基可供大家选择使用,如果您要了解或者选购的话,请点击我要选购,如果您在细胞实验中有任何疑问的话,也可以随时点击最右方的在线咨询,专业的技术人员将为您提供解答。