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细胞学堂 | 手把手教你培养SV-HUC-1

来源：Pricella　　浏览量：　　发布时间：2022-04-24 08:48:48

SV-HUC-1 (人输尿管上皮永生化细胞)，是由猿猴空泡病毒40转染至1名11岁男孩的泌尿道上皮细胞，而建立起来的永生化细胞系。其分化特性与正常细胞相似，培养简单，可无限传代，却不属于肿瘤细胞^[1]。

基础信息

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生长培养基：

Ham's F-12K＋10% FBS＋1% P/S

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生长特性：贴壁，上皮细胞样

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推荐传代比例：1:2-1:4

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推荐换液频率：2~3次/周

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培养条件：

气相：空气，95%；CO₂，5%

温度：37℃

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冻存条件：

55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

SV-HUC-1细胞正常生长

细胞传代

从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃；

用PBS冲洗细胞（每10cm²培养表面积约2mL 溶液）。从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液，以避免搅动细胞层，前后轻柔摇晃容器数次；

从培养容器中吸出冲洗液并丢弃，向培养瓶中加入0.25%胰酶（试剂量应足以覆盖细胞层）；

轻轻摇晃容器，使试剂完全覆盖细胞层，T25 细胞培养瓶留 200μL左右即可；

将培养容器放在培养箱中孵育5分钟左右，在显微镜下观察细胞解离情况；

当细胞解离程度≥ 90%时，倾斜培养容器，使细胞上液体尽快流尽，加入所用胰酶两倍体积的完全培养基，吹打细胞层表面数次，使培养基分散；

将细胞转移到无菌离心管中，以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟；

用最少体积的完全培养基重新悬浮细胞沉淀，将细胞悬液按照推荐比例稀释，并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中，再将细胞放回培养箱。

注意事项

1、待细胞汇合度达到80%-90%时，即可进行传代培养；

2、该细胞较难消化，注意延长消化时间。待消化到细胞收缩变圆，轻拍培养瓶侧边，细胞可以滑落方可终止消化；

3、如果使用培养瓶，在将其放入培养箱前，应将瓶盖旋松，以便进行充分的气体交换，除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶盖。

●参考文献●

[1] 王惠惠, 陈锋, 朱佳玉, 席淑华, 孙贵范. 亚砷酸钠对SV-HUC-1细胞NRF2通路影响[J]. 中国公共卫生, 2017, 33(1): 95-97.

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