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细胞学堂 | 血清批次存在差异怎么办

来源:Pricella  浏览量:  发布时间:2022-08-16 14:54:56

血清对细胞实验的重要性毋庸置疑。在往期的细胞学堂推文中,普诺赛向大家介绍了血清沉淀的相关问题。除了血清沉淀之外,血清批次差异也是血清使用过程中经常会遇到的问题,也是很多科研工作者在挑选血清时容易忽视的问题。

1

不同批次血清存在差异的原因

1

血清来源于动物,其组成成分有上千种左右;

2

血清组成及含量常随供血动物的年龄、生理条件和营养条件而异;

3

每个批号的组分百分比含量都不固定,所以批间差异是存在的。


2

不同批次血清存在差异时细胞的表现

不同批次血清存在差异时,细胞形态会发生变化,但其对细胞的影响远不止是形态的变化。整体来说,主要表现在以下几个方面:

细胞形态发生改变;

细胞贴壁性改变;

细胞产生空泡细胞;

细胞生长变得缓慢;

细胞不增殖;


640 (1)_副本.jpg
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图1. SH-SY5Y细胞更换血清后形态变化


640.jpg
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图2.  Hela细胞更换血清后形态变化


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640 (3).jpg

图3. SK-N-AS细胞更换血清出现圆形细胞


3

如何避免更换血清后对细胞的影响

使用新的血清前,先使用血清试用,如果试用效果好,则可购买和试用装批次相同的正装,囤积半年或一年的用量,避免批间差造成实验波动(胎牛血清在-20°C保存可达5年) ;

建议加高血清比例到15%或20%

试用新批次,如果新批次效果好,可更换血清批次;

驯化过渡;

轻度不适应细胞可自己调整。


4

血清适用一周后细胞状态恢复正常

L-929

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图4. L-929细胞刚更换血清(左) 适用一周后(右)


Renca

640 (4).jpg
640 (5)_副本.jpg

图5. Renca细胞刚更换血清(左) 适用一周后(右)

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