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细胞学堂 | SK-BR-3总是漂怎么办

来源:Pricella  浏览量:  发布时间:2022-10-10 13:39:34


SK-BR-3 [SKBR3]细胞(人乳腺腺癌细胞)是由Trempe·G和Old·L·J于1970年从一位43岁的白人女性乳腺癌患者的胸腔积液中分离得到的。SK-BR-3 [SKBR3]细胞过表达HER2/c-erb-2基因产物。



SK-BR-3细胞正常生长图

图1. SK-BR-3正常生长图片


培养SK-BR-3细胞时,最容易遇到的问题就是漂浮。SK-BR-3细胞从冷冻保存中恢复的速度可能很慢,并且在低温保存恢复过程中可能会不贴壁,但这是正常现象。SK-BR-3细胞在培养的第一周以及每次继代培养后都会出现松散的附着和漂浮的细胞。

如果存在大量漂浮物,尤其是在生长的第一周,复苏后几天内最好保持细胞不受干扰;在刚收到细胞时,可根据细胞密度进行传代,传代后3天不要动该细胞(如果培养基变色不明显的话),处理后细胞铺展状态良好(如图2)。


处理后的SK-BR-3细胞

图2. 处理后的SK-BR-3细胞

(图片来源于客户,仅供学习参考)


如果仍然有很多漂浮物,可用台盼蓝检查细胞是否存活。可将漂浮的细胞收集起来,通过轻轻离心保留漂浮细胞,并在更换培养基时将其与附着的细胞一起添加回同一培养容器中,不要分离或丢弃漂浮细胞。

细胞最初会以小斑块或细胞群的形式附着,许多细胞团仍处于悬浮状态,几天后,细胞将贴壁生长并向外延伸,有时也会出现一些细胞碎片,通过换液可去除。


注意事项


1

漂浮细胞应始终通过温和离心(125xg,持续5至7分钟)保留,并在换液或传代后放回培养容器;

2

SK-BR-3细胞倾向于相互堆积。在细胞达到70-80%汇合度之前不要用胰酶消化处理细胞。如果让细胞过度生长,细胞就会分离漂浮;

3

1周传代1次,若密度低,生长一周后可以1:1传代重新铺板一次,细胞形态会好看很多。


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