3T3-L1（小鼠胚胎成纤维细胞）(STR鉴定正确)

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英文名称：3T3-L1

货号： CL-0006

价格： ￥1600 ￥1600

规格：
1×10^6Cells/T25 (常温) 1×10^6Cells/Vial×2Vials (冻存)

注：冻存细胞需加收干冰运费，详情请咨询客服。

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3T3-L1（小鼠胚胎成纤维细胞）

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3T3-L1细胞专用培养基

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产品信息

产品名称 3T3-L1（小鼠胚胎成纤维细胞）
别称 3T3 L1;3T3L1;3T3-L1 ad;NIH-3T3-L1;NIH3T3-L1
种属 小鼠
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 成纤维细胞样
冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40% FBS+5% DMSO
温度：液氮
培养方案A（默认） 生长培养基：DMEM [PM150210]+10% NCS+1% P/S [PB180120]
培养条件：气相：空气，95%；CO₂，5%, 温度：37℃
推荐传代比例 1:3-1:5
推荐换液频率 2-3次/周

参考资料(来源文献)

背景描述 3T3-L1细胞是通过克隆分离得到的3T3（swiss小白鼠）的连续亚株。当3T3-L1细胞从快速分裂到长满且接触抑制时，3T3-L1细胞经过前脂肪向脂肪样逆转。培养液中，高血清含量可以促进3T3-L1细胞内脂肪的积累。
年龄（性别） Embryo;Male
组织来源 胚胎
细胞类型 自发永生化细胞
生物安全等级 BSL-1
受体表达情况 insulin, expressed
保藏机构 ATCC; CL-173 ATCC; CCL-92.1BCRC; 60159

位点信息

photo1

鉴定图

photo2

  • Q1:怎么去除死细胞？

    低速离心(800rpm，离心3mim)，主要是基于细胞密度和大小进行分离，死细胞和碎片比较轻，会残留在上清，活的细胞会留在离心管底部哈。这个可以去除大部分死细胞和碎片，但不能完全去除（会有少许残留）。

  • Q2:有些细胞传了几代之后，突然出现了一些圆形的漂浮细胞，这是正常情况？

    这个是正常的，细胞增殖是个动态的过程，每个细胞所处的状态不完全一样，这种漂浮的细胞里面可能是增殖后还未来的及贴下去的，也可能是一些衰老细胞，我们每次传代的操作多少会引起一些细胞损伤导致细胞贴壁性能减弱。只要整体细胞增殖情况正常，存在少量这种细胞，可以继续培养观察看看。

  • Q3:培养基配方里面的NCS指的是哪种

    NCS 指的是Newborn Calf Serum（新生牛小牛血清），建议选择出生年龄更小的牛血清。

  • Q4:刚买回来的细胞传多少代就冻存比较好？

    建议细胞买回来扩增1~2代后先冻存一管，一周后复苏看下细胞活力，确认细胞冻存条件合适后可以开始大量冻存。

  • Q5:哪些因素会导致细胞死亡？

    有多种因素可能导致这种情况：
    1. 二氧化碳浓度不正确:检查设置以确保 CO2 水平设置为适合您的细胞系的水平（通常在 5% 到 10% 之间）；经常检查线路连接是否有泄漏，避免频繁打开和关闭培养箱门。
    2. 培养箱中的温度波动：使用一个好用的温度计在培养箱内部监测温度。
    3. 两性霉素B或其他预防性抗生素/抗真菌药物的浓度有毒：按照推荐的浓度使用。
    4. 培养箱湿度不正确：检查水盘中的水位，湿度对于许多细胞和培养基而言至关重要，通常我们需要保证培养箱时刻有水，也就是饱和湿度。
    5. 培养基的渗透压不正确：大多数哺乳动物细胞可以耐受 260 至 350 mOsm/kg 的渗透压，过量添加某些试剂和药物可能会影响渗透压。
    6. 微生物污染：细菌和真菌污染通常很容易看到；支原体污染的症状比较难辨别，需要仔细监测细胞形态并定期进行检测以及早发现污染。
    7. 使用了不适当的培养基：确认所使用的培养基适用于您的细胞类型；需确认是否含有血清及必须营养成份、是否缺少某些微量元素成份、是否含有其他添加剂及药物、培养基是否过效期、培养基保存方式是否得当。

  • Q6:3T3-L1细胞可以用FBS培养进行扩增吗？

    使用胎牛血清细胞会增殖更快，可能会过度生长，密度过饱和后可能出现细胞开始分化的情况。这个细胞日常培养注意不要过饱和，80%密度及时传代。3T3-L1使用的血清是刚出生不久的新生牛血清。

  • Q7:3T3-L1细胞换液后大片的细胞飘起然后大面积剥落了？

    培养基使用前需要37度预热好，避免细胞预冷收缩，PBS需要恢复室温的；另外有可能是培养时间过长密度太大长太满了，细胞的贴壁性变弱，不要让这株细胞长得过满乃至开始融合，在细胞密度达到80%就传代，密度太高细胞容易飘。如果漂浮了，可以收集到离心管中进行消化，消化过程不吹散细胞团，消化完毕终止的时候吹散即可，重新接种。

  • Q8:不同引种单位的同一株细胞，RRID都是一样的吗？

    是的，同一个细胞系只有一个RRID。

  • Q9:冻存的细胞出现颜色不一致，有的红有的粉，对复苏会有影响吗？

    这种情况容易在不同冻存批次间出现，与冻存细胞的密度、冻存液配方、温度导致pH变化等有关，偶尔有遇到这种情况，不是绝对性对细胞状态有影响，可以复苏看下。

  • Q10:培养细胞的培养瓶可以重复利用吗？

    一般不建议重复利用，特别是贴壁不牢固细胞，重复利用会导致吸附性变差，漂浮增多；一个T25瓶建议使用最多不超过3次，其次需要注意无菌操作，避免污染。

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