bEnd.3 [BEND3]（小鼠脑微血管内皮细胞）(STR鉴定正确)

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英文名称：bEnd.3 [BEND3]

货号： CL-0598

价格： ￥1800 ￥1800

规格：
1×10^6Cells/T25 (常温) 1×10^6Cells/Vial×2Vials (冻存)

注：冻存细胞需加收干冰运费，详情请咨询客服。

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bEnd.3 [BEND3]（小鼠脑微血管内皮细胞）

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bEnd.3 [BEND3]细胞专用培养基

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产品信息

产品名称 bEnd.3 [BEND3]（小鼠脑微血管内皮细胞）
别称 bEND.3;b.End3;Bend.3;bEnd3;brain-derived Endothelial cells.3
种属 小鼠
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
冻存条件 冻存液：55% 基础培养基+40% FBS+5% DMSO
温度：液氮
培养方案A（默认） 生长培养基：DMEM [PM150210]+10% FBS [164210]+1% P/S [PB180120]
培养条件：气相：空气，95%；CO₂，5%, 温度：37℃
推荐传代比例 1:2-1:4
推荐换液频率 2-3次/周
注意事项
  1. 1.该细胞在低密度下形态不规则，细胞数量少，铺展面积大，高密度后形态会趋于一致，胞体密集。
  2. 2.细胞增殖偏慢，初次传代建议1:2，细胞稳定后建议传代比例也不超过1:4。
  3. 3.注意观察培养基颜色，颜色偏紫会导致细胞漂浮增加。
  4. 4.消化时间会随着细胞生长时间和细胞密度而有所不同，需要结合消化时细胞状态来判断，消化到细胞可以滑落方可终止。

参考资料(来源文献)

背景描述 The cells were transformed by infection with the NTKmT retrovirus vector that expresses polyomavirus middle T antigen.
年龄（性别） 6W;Sex unspecified
组织来源 大脑皮层
细胞类型 转化细胞系
生物安全等级 BSL-1
保藏机构 ATCC; CRL-2299 BCRC; 60515 ECACC; 96091929

位点信息

photo1

鉴定图

photo2

  • Q1:怎么去除死细胞？

    低速离心(800rpm，离心3mim)，主要是基于细胞密度和大小进行分离，死细胞和碎片比较轻，会残留在上清，活的细胞会留在离心管底部哈。这个可以去除大部分死细胞和碎片，但不能完全去除（会有少许残留）。

  • Q2:有些细胞传了几代之后，突然出现了一些圆形的漂浮细胞，这是正常情况？

    这个是正常的，细胞增殖是个动态的过程，每个细胞所处的状态不完全一样，这种漂浮的细胞里面可能是增殖后还未来的及贴下去的，也可能是一些衰老细胞，我们每次传代的操作多少会引起一些细胞损伤导致细胞贴壁性能减弱。只要整体细胞增殖情况正常，存在少量这种细胞，可以继续培养观察看看。

  • Q3:刚买回来的细胞传多少代就冻存比较好？

    建议细胞买回来扩增1~2代后先冻存一管，一周后复苏看下细胞活力，确认细胞冻存条件合适后可以开始大量冻存。

  • Q4:哪些因素会导致细胞死亡？

    有多种因素可能导致这种情况：
    1. 二氧化碳浓度不正确:检查设置以确保 CO2 水平设置为适合您的细胞系的水平（通常在 5% 到 10% 之间）；经常检查线路连接是否有泄漏，避免频繁打开和关闭培养箱门。
    2. 培养箱中的温度波动：使用一个好用的温度计在培养箱内部监测温度。
    3. 两性霉素B或其他预防性抗生素/抗真菌药物的浓度有毒：按照推荐的浓度使用。
    4. 培养箱湿度不正确：检查水盘中的水位，湿度对于许多细胞和培养基而言至关重要，通常我们需要保证培养箱时刻有水，也就是饱和湿度。
    5. 培养基的渗透压不正确：大多数哺乳动物细胞可以耐受 260 至 350 mOsm/kg 的渗透压，过量添加某些试剂和药物可能会影响渗透压。
    6. 微生物污染：细菌和真菌污染通常很容易看到；支原体污染的症状比较难辨别，需要仔细监测细胞形态并定期进行检测以及早发现污染。
    7. 使用了不适当的培养基：确认所使用的培养基适用于您的细胞类型；需确认是否含有血清及必须营养成份、是否缺少某些微量元素成份、是否含有其他添加剂及药物、培养基是否过效期、培养基保存方式是否得当。

  • Q5:bEnd.3细胞培养的时候有较多漂浮的细胞和碎片是否正常?

    细胞生长过程中会有大约10%活细胞单颗漂浮，这部分细胞单独培养不会贴壁，培养过程中不用特别处理，生长过程中会产生碎片。

  • Q6:bEnd.3细胞通常消化多久？

    细胞培养时间越长越难消化，每次消化时间可能不固定，消化时以细胞镜下状态为准，细胞触角收缩，细胞间隙明显变大，轻拍培养瓶细胞可以脱落时可终止消化，注意轻柔吹打细胞。

  • Q7:bEnd.3细胞形态有很多触角是否正常？为什么低密度和高密度细胞形态不一样？

    这个细胞低密度呈现不规则细胞形态，细胞铺展会比较大，高密度呈规则纤维状形态会更规则。

  • Q8:不同引种单位的同一株细胞，RRID都是一样的吗？

    是的，同一个细胞系只有一个RRID。

  • Q9:冻存的细胞出现颜色不一致，有的红有的粉，对复苏会有影响吗？

    这种情况容易在不同冻存批次间出现，与冻存细胞的密度、冻存液配方、温度导致pH变化等有关，偶尔有遇到这种情况，不是绝对性对细胞状态有影响，可以复苏看下。

  • Q10:培养细胞的培养瓶可以重复利用吗？

    一般不建议重复利用，特别是贴壁不牢固细胞，重复利用会导致吸附性变差，漂浮增多；一个T25瓶建议使用最多不超过3次，其次需要注意无菌操作，避免污染。

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