CTLL-2(小鼠T细胞)(STR鉴定正确)

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英文名称:CTLL-2

货号: CL-0331

价格: ¥3000 ¥3000

规格:
1×10^6Cells/T25 (常温) 1×10^6Cells/Vial×2Vials (冻存)

注:冻存细胞需加收干冰运费,详情请咨询客服。

套餐1

CTLL-2(小鼠T细胞)

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CTLL-2细胞专用培养基

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产品信息

产品名称 CTLL-2(小鼠T细胞)
别称 CTLL2;CTLL(2)
种属 小鼠
生长特性 悬浮细胞
细胞形态 淋巴母细胞样
冻存条件 冻存液:90% FBS+10% DMSO
温度:液氮
培养方案A(默认) 生长培养基:RPMI-1640 [PM150110]+10% FBS [164210]+100 U/mL recombinant IL-2 [PCK025]+1.0 μg/mL Con A+1% P/S [PB180120]
培养条件:气相:空气,95%;CO₂,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:2-1:3
推荐换液频率 2-3次/周
注意事项
  1. 1.该细胞为IL-2依赖型细胞,实验室可以常备IL-2,发现细胞状态不好,散在细胞变多,细胞不生长等情况,以 100 U/mL的浓度添加 IL-2,培养2-3天后状态会有改善。
  2. 2.该细胞冻存后再复苏需要2周左右时间来调整状态,调整过程中细胞碎片较多,具体操作请咨询技术支持,在技术支持的指导下进行,且该细胞冻存条件为90% FBS+10% DMSO。

参考资料(来源文献)

背景描述 CTLL-2细胞是一株具有细胞毒作用的IL-2依赖型的T-细胞株。
组织来源 T细胞
细胞类型 转化细胞系
生物安全等级 BSL-1
受体表达情况 interleukin 2 (IL-2), expressed
保藏机构 ATCC; TIB-214 DSMZ; ACC-27 ECACC; 93042610

位点信息

photo1

鉴定图

photo2
  • Q1:CTLL-2细胞可以体外加因子诱导成CD8+吗?

    文献显示可以诱导为CD8+: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14989115/

  • Q2:CTLL2细胞表达CD3,CD4,CD8吗?

    文献显示CD3,CD4,CD8不表达: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14989115/

  • Q3:怎么去除死细胞?

    低速离心(800rpm,离心3mim),主要是基于细胞密度和大小进行分离,死细胞和碎片比较轻,会残留在上清,活的细胞会留在离心管底部哈。这个可以去除大部分死细胞和碎片,但不能完全去除(会有少许残留)。

  • Q4:有些细胞传了几代之后,突然出现了一些圆形的漂浮细胞,这是正常情况?

    这个是正常的,细胞增殖是个动态的过程,每个细胞所处的状态不完全一样,这种漂浮的细胞里面可能是增殖后还未来的及贴下去的,也可能是一些衰老细胞,我们每次传代的操作多少会引起一些细胞损伤导致细胞贴壁性能减弱。只要整体细胞增殖情况正常,存在少量这种细胞,可以继续培养观察看看。

  • Q5:刚买回来的细胞传多少代就冻存比较好?

    建议细胞买回来扩增1~2代后先冻存一管,一周后复苏看下细胞活力,确认细胞冻存条件合适后可以开始大量冻存。

  • Q6:哪些因素会导致细胞死亡?

    有多种因素可能导致这种情况:
    1. 二氧化碳浓度不正确:检查设置以确保 CO2 水平设置为适合您的细胞系的水平(通常在 5% 到 10% 之间);经常检查线路连接是否有泄漏,避免频繁打开和关闭培养箱门。
    2. 培养箱中的温度波动:使用一个好用的温度计在培养箱内部监测温度。
    3. 两性霉素B或其他预防性抗生素/抗真菌药物的浓度有毒:按照推荐的浓度使用。
    4. 培养箱湿度不正确:检查水盘中的水位,湿度对于许多细胞和培养基而言至关重要,通常我们需要保证培养箱时刻有水,也就是饱和湿度。
    5. 培养基的渗透压不正确:大多数哺乳动物细胞可以耐受 260 至 350 mOsm/kg 的渗透压,过量添加某些试剂和药物可能会影响渗透压。
    6. 微生物污染:细菌和真菌污染通常很容易看到;支原体污染的症状比较难辨别,需要仔细监测细胞形态并定期进行检测以及早发现污染。
    7. 使用了不适当的培养基:确认所使用的培养基适用于您的细胞类型;需确认是否含有血清及必须营养成份、是否缺少某些微量元素成份、是否含有其他添加剂及药物、培养基是否过效期、培养基保存方式是否得当。

  • Q7:CTLL-2细胞用什么冻存液冻存细胞比较好呢

    细胞冻存建议提高细胞密度,冻存时细胞密度不宜在10^6/ml以下;细胞冻存条件建议使用90%FBS+10%DMSO冻存液,搭配程序性冻存盒使用。冻存的时候注意完全吹散细胞,保证冻存液包裹住每个细胞,这样保存效果更好一些。

  • Q8:CTLL-2细胞培养到什么程度可以传代处理,培养过程中需要注意什么?

    细胞对营养需求高,请使用优质胎牛血清培养。培养时维持5X10*5-1*10^6/ml以上密度培养,细胞聚团悬浮生长,但需要注意培养基的消耗较大,换液频率增加。细胞密度达到1X10*6/ml的量可准备传代,大部分情况下细胞聚团生长,实验室可以常备 IL-2,发现细胞状态不好,散在细胞变多,细胞不生长等情况,以 100U/mL 的浓度添加 IL-2,培养 2-3 天后状态会有改善;但有时候也有出现细胞单颗生长不聚团,也是持续增殖的,这种也正常培养,属于正常现象,不用太担心。

  • Q9:CTLL-2细胞复苏的时候有什么需要注意的事项么?

    这个细多,黑点较多,需要按照2-3天换液一次持续培养2-3周以调整细胞状态,换液方式为离心重悬,注意吹打力度不宜过大,保证细胞吹散即可。同时注意细胞密度维持在1*10^6/ml,调整状态过程中细胞碎片较多,死细胞较多会使整体细胞量下降,需要根据细胞量适当缩小培养体积以提高细胞密度(如将培养瓶竖置或换用孔板培养等)。当细胞出现聚团,此时细胞状态才会逐步变好。正常情况下,细胞状态以聚团为主时,状态最佳。

  • Q10:CTLL-2细胞表达il-2的α、γ、β受体吗

    CTLL-2细胞表达IL-2的受体,包括α链(CD25)、β链(CD122)和γ链(CD132)。这些受体共同组成了高亲和力的IL-2受体复合体,能够有效地结合IL-2并传递信号,促进细胞增殖和功能调节。IL-2 通过与 IL-2 受体 (IL-2R) 结合来调控细胞的功能。

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