NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)(STR鉴定正确)

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英文名称:NK-92MI

货号: CL-0533

价格: ¥2200 ¥2200

规格:
1×10^6Cells/T25 (常温) 1×10^6Cells/Vial×2Vials (冻存)

注:冻存细胞需加收干冰运费,详情请咨询客服。

套餐1

NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)

¥2200

NK-92MI细胞专用培养基

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产品信息

产品名称 NK-92MI(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞)
别称 NK-92 MI;NK-92 mi;NK92-MI;NK92MI;NK-92 transfected with MFG-Hil2
种属
生长特性 悬浮细胞
细胞形态 淋巴母细胞样
冻存条件 冻存液:90% FBS+10% DMSO
温度:液氮
培养方案A(默认) 生长培养基:MEMα [PM150422]+0.2 mM Inositol+0.1 mM β-mercaptoethanol+0.02 mM Folic Acid+12.5% HS [164215]+12.5% FBS [164210]+1% P/S [PB180120]
培养条件:气相:空气,95%;CO₂,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 5×10⁵-1×10⁶ cells/mL
推荐换液频率 2-3次/周
注意事项
  1. 该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液。
  2. 请勿直接倒掉细胞培养液。

参考资料(来源文献)

背景描述 NK-92细胞是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株IL-2依赖型NK细胞株。NK-92MI细胞是转染得到的源自NK-92细胞的IL-2非依赖的NK细胞株。亲本细胞NK-92通过微粒体基因转化法用逆转录病毒MFG-hIL-2载体携带的人IL-2cDNA进行转化。可能由于载体整合到基因组DNA中,转化是稳定的。这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性;铬释放试验显示它能杀死K562细胞和Daudi细胞。NK-92细胞有以下特征:CD2、CD7、CD11a、CD28、CD45、CD54表面标记阳性;CD1、CD3、CD4、CD5、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34和HLA-DR表面标记阴性。其亲本IL-2依赖的细胞株NK-92细胞及另一株同样来源于NK-92细胞株的IL-2非依赖的细胞株NK-92CI都可从ATCC得到。NK-92MI细胞和NK-92CI细胞这两个变种都包含、表达并合成hIL-2cDNA。NK-92MI细胞合成的IL-2水平比NK-92CI高,而亲本细胞不合成表达。1998年9月提交到ATCC的培养物污染了支原体,其后代通过BM细胞周期蛋白处理21天消除支原体。处理后6周,用Hoechst染色、PCR和标准培养测试进行支原体检测,结果都呈阴性。
年龄(性别) 50Y;Male
组织来源 外周血
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 淋巴瘤细胞
生物安全等级 BSL-2
保藏机构 ATCC; CRL-2408

位点信息

photo1

鉴定图

photo2
  • Q1:怎么去除死细胞?

    低速离心(800rpm,离心3mim),主要是基于细胞密度和大小进行分离,死细胞和碎片比较轻,会残留在上清,活的细胞会留在离心管底部哈。这个可以去除大部分死细胞和碎片,但不能完全去除(会有少许残留)。

  • Q2:有些细胞传了几代之后,突然出现了一些圆形的漂浮细胞,这是正常情况?

    这个是正常的,细胞增殖是个动态的过程,每个细胞所处的状态不完全一样,这种漂浮的细胞里面可能是增殖后还未来的及贴下去的,也可能是一些衰老细胞,我们每次传代的操作多少会引起一些细胞损伤导致细胞贴壁性能减弱。只要整体细胞增殖情况正常,存在少量这种细胞,可以继续培养观察看看。

  • Q3:咨询NK 92和NK 92MI的区别?

    NK-92和NK-92MI 细胞是两种来源于人类自然杀伤细胞 (NK cells) 的细胞系,它们之间有个关键的区别:NK-92 细胞依赖IL-2 生长,培养过程中需要添加IL-2; NK-92 MI 自身可以分泌IL-2 ,它不需要外源性 IL-2 就可以生长。

  • Q4:刚买回来的细胞传多少代就冻存比较好?

    建议细胞买回来扩增1~2代后先冻存一管,一周后复苏看下细胞活力,确认细胞冻存条件合适后可以开始大量冻存。

  • Q5:哪些因素会导致细胞死亡?

    有多种因素可能导致这种情况:
    1. 二氧化碳浓度不正确:检查设置以确保 CO2 水平设置为适合您的细胞系的水平(通常在 5% 到 10% 之间);经常检查线路连接是否有泄漏,避免频繁打开和关闭培养箱门。
    2. 培养箱中的温度波动:使用一个好用的温度计在培养箱内部监测温度。
    3. 两性霉素B或其他预防性抗生素/抗真菌药物的浓度有毒:按照推荐的浓度使用。
    4. 培养箱湿度不正确:检查水盘中的水位,湿度对于许多细胞和培养基而言至关重要,通常我们需要保证培养箱时刻有水,也就是饱和湿度。
    5. 培养基的渗透压不正确:大多数哺乳动物细胞可以耐受 260 至 350 mOsm/kg 的渗透压,过量添加某些试剂和药物可能会影响渗透压。
    6. 微生物污染:细菌和真菌污染通常很容易看到;支原体污染的症状比较难辨别,需要仔细监测细胞形态并定期进行检测以及早发现污染。
    7. 使用了不适当的培养基:确认所使用的培养基适用于您的细胞类型;需确认是否含有血清及必须营养成份、是否缺少某些微量元素成份、是否含有其他添加剂及药物、培养基是否过效期、培养基保存方式是否得当。

  • Q6:NK-92MI细胞达到什么密度可以传代?

    细胞是成团生长的,培养过程细胞会聚集在培养瓶当中某个区域生长,可以轻轻晃匀之后,静置5-10分钟观察,大部分区域100倍镜下有6-8个细胞团可以补液分瓶,推荐1:2-1:3传代。

  • Q7:NK-92MI细胞状态不好的时候需要补加IL-2吗?

    此细胞是不依赖IL-2,培养过程无需添加IL-2,如果有部分死细胞,可以尝试提高血清比例5%。如果是状态特别差需要急救的情况,可以适当添加IL-2,有助于细胞恢复状态。

  • Q8:NK-92MI细胞培养过程有单个细胞及碎片,是状态不好了吗?

    细胞团之间也是有一些单个的细胞即碎片,这个是正常现象,平时不要刻意吹散细胞团,如果细胞团过大,可以轻轻晃动或轻拍培养瓶,使细胞团块分散开。如果碎片过多,可以换液时800转离心5分钟,去除碎片,一周左右离心一次即可。

  • Q9:不同引种单位的同一株细胞,RRID都是一样的吗?

    是的,同一个细胞系只有一个RRID。

  • Q10:冻存的细胞出现颜色不一致,有的红有的粉,对复苏会有影响吗?

    这种情况容易在不同冻存批次间出现,与冻存细胞的密度、冻存液配方、温度导致pH变化等有关,偶尔有遇到这种情况,不是绝对性对细胞状态有影响,可以复苏看下。

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