全国免费热线:400 650 3656

您身边的细胞培养专家!

忘记密码

个人邮箱:
验证码: captcha

账号激活

个人邮箱:
×
当前位置:首页 >> 技术支持 >> 实验指南 >> 详细内容

技术支持Technical Support

联系我们CONTACT US

细胞学堂 | RPMI8226培养易被忽视的问题

来源:Procell  浏览量:  发布时间:2022-03-01 09:45:15

RPMI8226是1966年从一名61岁男性浆细胞瘤患者的外周血中分离出的B淋巴细胞,它们可用于免疫学和免疫系统疾病的研究。该细胞系是合适的转染宿主。

基础信息


形态特征

与其他由外周血白细胞发展而来的细胞系相似,该细胞亦表现出淋巴母细胞形态特征。该细胞系未见典型的成熟浆细胞,但有未成熟浆细胞,胞浆染色较深。扫描电镜照片显示,几乎所有细胞内部都有一层围绕细胞排列的肿胀的内质网。这在其他细胞系中未曾出现,这些结构特征类似于发展中的浆细胞。该细胞培养物中未发现白细胞病毒。

基因表达

该细胞仅表达游离形式的人类免疫球蛋白λ型轻链。

特点

目前,学界暂没有证据表明,RPMI8226细胞能产生重链(细胞质型或分泌型)。

病毒易感性

人脊髓灰质炎病毒1、单纯疱疹病毒、痘苗病毒、水泡性口炎病毒等,都是RPMI8226细胞容易感染的。

细胞培养


#01

细胞培养条件

RPMI-1640(PM150110)+10%FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)。

#02

生长特性


细胞主要以悬浮的单细胞形式生长,部分细胞可能贴壁生长(有时可达50%);


细胞大小不均一。

#03

倍增时间

60小时(PubMed=25984343); 33.5小时(NCI-DTP); 60-70小时 (DSMZ)。

#04

传代方式

建议传代密度为3-5×10^5个活细胞/mL;生长密度不超过2-3×10^6个活细胞/mL。

可通过补液、离心或更换新鲜培养基的形式培养此细胞,细胞传代培养密度控制在5×10^5-2×10^6活细胞/mL为佳。换液频率建议2-3次/周。

#05

冻存和复苏

冻存密度:推荐冻存密度1×10^6 个活细胞/mL。

冻存条件:55%基础培养基+40%血清+5%DMSO;液氮保存。


RPMI8226生长图片
RPMI8226生长图片

RPMI8226生长图片


· 注意事项 · 



1、严格控制传代密度,密度过低或者过大都容易造成细胞死亡;

2、密度低的时候,尽量少动少离心,以减少对细胞的伤害;

3、状态不好时可补加2mM谷氨酰胺;

4、在培养过程中会出现细胞碎片过多的情况,可以用低速离心去除,一般为800r/min,(由于低速离心会损失部分细胞,故此操作不适合细胞密度过低时使用);

5、冻存复苏时保证接种密度,复苏后维持培养环境的稳定,一般24h后再观察细胞状态。



温馨提醒:

如果您想要了解或选购细胞系或者原代细胞,请点击我要选购,有任何疑问也可以点击右方的在线咨询,专业技术人员将为您提供解答。



朱莎莉

朱莎莉

【 湖北、河南 】

刘本佳

刘本佳

【 江苏、上海、安徽 】

章臣雄

章臣雄

【 广东、广西、贵州、云南 】

閤春喜

閤春喜

【 四川、重庆、陕西、甘肃、西藏 】

石文平

石文平

【 北京、黑龙江、吉林、辽宁 】

任施博

任施博

【 江西、福建、新疆、海南 】

李荣枫

李荣枫

【 天津、河北、内蒙古、山西 】

陈雨兰

陈雨兰

【 湖南、山东、宁夏、青海 】

陈琼

陈琼

【浙江】

黄龄

黄玲

【 四川、陕西、甘肃、重庆、西藏、浙江 】

李欢欢

李欢欢

【 江苏、安徽、河北、山西、天津、内蒙古 】

周璇

周璇

【 广东、福建、海南、江西、新疆、宁夏、青海 】

卢丽丽

卢丽丽

【 北京、辽宁、吉林、黑龙江 】

姚娟

姚娟

【 湖北、上海、河南】

蔡玉洁

蔡玉洁

【 湖南、广西、贵州、云南、山东】