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细胞学堂 | 培养BEAS-2B需要血清吗

来源:Pricella  浏览量:  发布时间:2022-09-26 09:56:08

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BEAS-2B(人正常肺上皮细胞)是一种SV40大型t抗原永生化的人肺上皮细胞系,被广泛用作肺上皮细胞的体外模型,包括毒理学测试、呼吸损伤、伤口愈合和肿瘤转化;除此之外,它还是合适的转染宿主


BEAS-2B 的表型为何不同

BEAS-2B细胞为上皮细胞样,而有客户反应,自己培养的形态像成纤维细胞,不像上皮细胞,与ATCC中的细胞形态不一致(如图1,2)。


客户培养的BEAS2B细胞形态

图1. 客户培养的BEAS-2B形态(仅供学习参考)

ATCC上的BEAS2B细胞形态

图2. ATCC上的BEAS-2B形态


这是因为BEAS-2B细胞保留了对血清反应进行鳞关分化的能力,培养时加与不加血清,会出现不同的细胞形态。BEAS-2B常用的培养条件有2种:BEBM 支气管上皮细胞生长培养基(不含血清),或DMEM+10%FBS。

用不含血清的培养基培养时,BEAS-2B细胞具有典型的呼吸上皮细胞多边形态;用含血清的培养基培养时,密度低时细胞形态会呈长梭型,但密度高一些以后形态会变短。


注意:

#传代密度不能太低,最少不能低于60%;

#使用BEBM培养基培养时,培养瓶应预先涂有溶解在BEBM培养基中的 0.01 mg/mL 纤连蛋白、0.03 mg/mL I 型牛胶原蛋白和 0.01 mg/mL 牛血清白蛋白的混合物;

#血清影响细胞贴壁性,进一步影响细胞形态;

#培养条件的改变对细胞形态和功能都有影响;

#不要随意更改细胞培养条件。

有无血清对细胞的影响


1

比较添加或不添加胎牛血清的BEAS-2B全基因组基因表达,发现多种生物途径的表达发生了改变,包括与致癌和能量代谢相关的途径;

2

对BEAS-2B中耗氧量和糖酵解的实时测量表明,胎牛血清培养条件下,总糖酵解能力增加1.4倍,基础呼吸增加1.9倍;

3

与不含胎牛血清的BEAS-2B相比,ATP产生的氧气消耗增加0倍,最大呼吸增加 2.8倍;

4

比较胎牛血清暴露于1μM亚砷酸钠引起的转录组变化导致的BEAS-2B的转录组变化,发现43%的亚砷酸盐调节基因的 mRNA水平也受到胎牛血清的调节;

5

细胞毒性研究显示,暴露于5%胎牛血清8周的BEAS-2B细胞对亚砷酸盐细胞毒性的敏感性几乎是非暴露于胎牛血清的BEAS-2B细胞的5倍;

6

胎牛血清诱导的BEAS-2B的表型变化表明,在使用BEAS-2B作为砷毒性的实验模型时 ,应仔细考虑培养条件。


参考文献

[1] Zhao F ,  Klimecki W T . Culture conditions profoundly impact phenotype in BEAS‐2B, a human pulmonary epithelial model[J]. Journal of Applied Toxicology Jat, 2015, 35(8):945-951.


注:部分图片来源于网络


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